Como a cromatografia líquida de alto desempenho está sendo usada no laboratório

Como

A cromatografia líquida de alta eficiência, ou HPLC, está se tornando uma das ferramentas mais utilizadas em análises químicas. Esta poderosa instrumentação usa muitos meios como cromatografia em camada fina e cromatografia em coluna, na qual se baseia.

Para entender a HPLC, precisamos primeiro entender o básico da cromatografia. Cromatografia é a separação de produtos químicos ou materiais que são misturados. Por exemplo, se você tiver uma mistura de corante vermelho e corante azul, você terá uma mistura de cor roxa. Para separar cada uma das cores, deve-se entender que o corante vermelho tem propriedades físicas diferentes do azul, então quando um solvente é usado para misturar os corantes, eles podem ser separados usando cromatografia de camada fina.

Cromatografia de camada jaleco fina é quando o solvente flui até uma placa fina devido à ação capilar do solvente. O solvente carrega cada corante com ele, eventualmente separando-os devido às suas propriedades físicas. O que resta seria um ponto no prato que é vermelho, e possivelmente acima dele, uma mancha de azul. Você separou os corantes em seus componentes básicos.

Na cromatografia colunar, o princípio é o mesmo, exceto que você usa um tubo de vidro, ou coluna, para separar os produtos químicos. Ainda existe um solvente envolvido, mas em vez dos produtos químicos que fluem para cima, eles fluem para baixo pelo uso da gravidade natural ou bombas fluídicas. Cada produto químico é separado dentro do substrato do solvente e pode ser purificado desta maneira.

Na cromatografia líquida de alta eficiência, todo este processo é acelerado, devido ao uso de altas pressões para o solvente passar pela coluna. As pressões utilizadas são cerca de 400 vezes a atmosfera terrestre, pelo que a velocidade é naturalmente o resultado.

O estado da fase dos materiais sendo separados ou testados é importante em HPLC. Uma fase líquida é a mais comum e mais fácil de separar, por isso vamos usá-la como exemplo. Sob pressão, as partículas a serem separadas podem ser menores, e as interações de quaisquer revestimentos especiais na superfície interna da coluna e as últimas a serem separadas são muito mais sensíveis.

Na análise de HPLC de fase normal, as partículas de sílica são usadas com uma polaridade positiva e o solvente é do tipo hexano não polar. Os materiais que precisam de separação tendem a aderir aos silicatos, em vez de ao solvente, de modo que são facilmente demarcados e fluem como uma solução purificada para fora da coluna.

Na HPLC de fase reversa, o solvente será o transportador das moléculas separadas em vez das partículas de sílica. Isso é mais comumente usado ao extrair produtos químicos especiais de uma mistura. Um exemplo seria extrair as substâncias químicas comuns das plantas que são benéficas para os seres humanos, como, digamos, a aspirina.

Essa técnica é usada em todo o mundo para a extração de muitos produtos químicos benéficos para produtos farmacêuticos, cosméticos e produção de produtos químicos. É usado por quase todos os laboratórios de pesquisa química da Terra e é útil nos campos bioquímico e biomédico. Sem o HPLC, os processos para extrair materiais ou separar produtos químicos seriam praticamente inexistentes.

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